實驗的所有步驟都必須經(jīng)過優(yōu)化，以便觀察到特異染色，并盡可能減少非特異的背景染色。這包括開展預(yù)實驗，以確定每個一抗的適當(dāng)孵育條件?？乖H和純化的多克隆抗體的稀釋度通常低于單克隆抗體，但這些值必須根據(jù)經(jīng)驗確定。
注意：為了獲得可靠特異的信號，應(yīng)采用交叉反應(yīng)性極少的高質(zhì)量抗體。
1、一抗孵育的起始條件：
2、一抗孵育的優(yōu)化：
一抗?jié)舛?、稀釋液、孵育時間和溫度都影響了染色質(zhì)量。這些變量需要針對每個抗體和樣品來優(yōu)化，以便實現(xiàn)特異染色和低背景。優(yōu)化通常是保持孵育時間和溫度不變，而改變抗體濃度，以確定何時獲得*信號和低背景噪音。例如，如果使用高親和力的抗體，那么相對較高的濃度可能需要較短的孵育時間。相反，較低的抗體濃度可能需要較長的孵育時間。人們通常采用較長的孵育時間，以確?？贵w*滲透到體視學(xué)技術(shù)所用的組織切片。為了促進特異染色，較長時間的孵育通常在低溫下開展（即4°C vs 室溫）。
上海恒遠生物科技有限公司坐落于美麗的上海，于2008年成立，是一家生物技術(shù)企業(yè)，主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)及銷售。主要產(chǎn)品有進口BIM/RD/TSZ ELISA試劑盒、NQBB/GIBCO/HYCLONE 血清、ABCAM抗體、SIGMA/SPECTRUM/AMRESCO 生物科研試劑、USP標(biāo)準品、實驗耗材等。公司自成立以來一直以質(zhì)量求生存，以信譽求發(fā)展的精神，精益求精，力求做到更好，全體員工孜孜不倦為國內(nèi)科研事業(yè)單位以及高校等提供的產(chǎn)品服務(wù)！
點擊交流