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恒遠(yuǎn)生物|人羊膜細(xì)胞(WISH)培養(yǎng)建議

  • 發(fā)布日期:2023-05-24      瀏覽次數(shù):1280
    • 品牌: 恒遠(yuǎn)生物

      貨號: HYCC10347

      中文名稱: 人羊膜細(xì)胞;WISH

      規(guī)格: T25

      形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣

      生長特性: 貼壁生長

      特征特性: 最初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的;角蛋白陽性。

      培養(yǎng)條件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 

      傳代方法: 1:2~1:4傳代,每周2~3次。

      凍存條件: 無血清細(xì)胞凍存液


      一、細(xì)胞培養(yǎng)常見問題解答


      1.培養(yǎng)基為什么一般都是偏紅色?

      因?yàn)榕囵B(yǎng)基加了酚紅來顯示顏色,指示pH范圍為6-8,顏色會(huì)由黃變?yōu)樽霞t。這是為了我們能更直觀觀察培養(yǎng)液的變化,如變黃,則代表偏酸,偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說,細(xì)胞吸收營養(yǎng)后,變黃后就暗示我們要換培養(yǎng)基啦!所以密切觀察很重要哦!


      2.細(xì)胞的居住環(huán)境

      舒適無菌的環(huán)境是細(xì)胞健康生活的重要基礎(chǔ)。如下圖為培養(yǎng)細(xì)胞的器皿,包括形狀、規(guī)格、用途多樣的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿及培養(yǎng)板。最終住進(jìn)37℃,5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱。


      3.細(xì)胞培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶區(qū)別?

      就細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)來說,培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿沒有太大區(qū)別,主要在于安全系數(shù)(培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)、培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量(大培養(yǎng)瓶>培養(yǎng)皿)。但是培養(yǎng)瓶成本也會(huì)相對較高,因此無特殊要求,一般選擇培養(yǎng)皿即可。


      4.為什么細(xì)胞復(fù)蘇后,很多難以貼壁?

      忽略培養(yǎng)基的問題,主要考慮細(xì)胞凍存時(shí)狀態(tài)差或者復(fù)蘇時(shí)動(dòng)作太慢導(dǎo)致細(xì)胞死亡。切記最重要的融化速度要快,可不時(shí)搖動(dòng)冷凍管,使之盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。


      5.細(xì)胞凍存時(shí)對細(xì)胞量有要求嗎?

      細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)會(huì)有一定的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,起始濃度106—107個(gè)/ml/管。


      6.細(xì)胞污染怎么辦?

      如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染,一般建議丟棄。如果細(xì)胞非常寶貴,可試著加入含抗生素的培養(yǎng)基反復(fù)清洗,并用抗生素含量高的培養(yǎng)基培養(yǎng),并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。


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