細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響.細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵.細胞培養工作包括:工作液配制、無菌操作(采樣)、溫育、無菌處理,細胞和用品貯存等.細胞培養室的設計實施原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養于一室,而洗刷消毒在另一室.
一、常用設施及設備:
(1)超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側流式、直流式和外流式三大類.
(2)無菌操作間:一般由更衣間、緩部間和操作間三部分組成.操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養箱、離心機、倒置顯微鏡等.緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無菌物品等.
(3)操作間:普通培養箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物品.
(4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等.
(5)分析間:顯微鏡、計算機及打印機等.
二、培養器皿:
細胞培養以玻璃器皿為主,常準備zui需是使用zui的三倍.器皿應選擇透明度好、無毒、中性硬度玻璃制品.常用的玻璃器皿有下面幾種.
(1)液體儲存瓶:用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體,常以500ml、250ml、100ml生理鹽水瓶或血漿瓶代替.
(2)培養瓶:根據培養細胞種類要求不同培養瓶的形態各異,用于細胞傳代培養的細胞要求瓶壁厚簿均勻,便于細胞貼壁生長和觀察,瓶口要大小一致,口徑一般不小于1cm,允許吸管伸入瓶內任何部位,規格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml等幾種.用于外周血培養的常用10ml普通圓瓶.兩種培養瓶均要求選用玻璃制成.
(3)培養皿:用于開放式培養及其它用途.分直徑30mm、60mm、120mm等幾種.
(4)吸管:常用的有長吸管和短吸管兩類,長吸管也稱刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用于移動液體.常用1ml和10ml兩種.短吸管也叫滴管,分彎頭和直頭兩種.
(5)離心管:離心管是細胞培養中使用zui廣泛的器皿,根據用途不同形態各樣,常用于細胞培養的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類.前者分別為50ml、30ml、15ml;后者則多為10ml和5ml.
(6)其它:如三角燒瓶、燒杯、量筒、漏斗、注射器等.
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