ELISA操作用蔗糖封閉的原理

    ELISA封閉為了減少非特異性.也就是說,封閉中的蛋白會非特異性將elisa板子中沒有結(jié)合包被物的位點(diǎn)封閉掉,這樣之后加入的抗原或者抗體就不會再和板子發(fā)生非特異性的結(jié)合.使elisa的結(jié)果更加的準(zhǔn)確。ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn)，蔗糖封閉的原理：
1、ELISA實(shí)驗(yàn)中，蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護(hù)劑"的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理;那一種更好需要你實(shí)驗(yàn)后來驗(yàn)證。但多數(shù)選擇前者。封閉劑還可用5%的脫脂乳，0.4%的明膠，但是實(shí)驗(yàn)表明前者比較好，后者不容易洗干凈未結(jié)合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結(jié)合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上，結(jié)合抗體或抗原的時(shí)候就不會產(chǎn)生非特異結(jié)合了，不會影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度。