近期開始，眾多從事醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)、動物學(xué)、植物學(xué)等碩士研究生即將迎來他們的畢業(yè)課題。其中不乏有真正沒有自己獨立操作過ELISA實驗的新手。而即將迎來的畢業(yè)課題將又不得不靠自己獨立完成。在此。我司技術(shù)部歐陽技術(shù)總結(jié)ELISA實驗操作易走的誤區(qū)。希望能夠幫助到廣大科研新手順利完成實驗、順利畢業(yè)。
①：液體全部加入酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s，使液體充分混合均勻，也使其得到充分的反應(yīng)。
②：盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。
③：手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
④：將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸，液滴會自然流下去。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔，防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
⑤：由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。
⑥：底物為TMB，避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
⑦：要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性，可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì)，溫度環(huán)境為20%左右時，lmL的水可以看作是lg、20L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
⑧：實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同，酶標(biāo)板只要取出所需量。
⑨：孵育時要使蓋板膜封好酶標(biāo)板，防止水分蒸發(fā)，以防曲線不成線性。
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